激光血流成像在MCAO模型的应用

       MCAO是一种局灶性脑缺血模型，目前应用最广泛的脑缺血模型。其发病机理与人类缺血性脑卒中表现相似，对于制作模拟人脑缺血模型对脑缺血发病机制及药物筛选有重要意义。而激光散斑血流成像系统，是基于激光散斑对比分析技术，可对大面积组织进行实时的血流动态成像监测可用于人和动物观察血管的血流分布和变化的实际需求；为血流灌注和微循环研究提供了全新方法。

       如此激光散斑血流成像系统在MCAO模型上的研究应用有着得天独厚的优势，尤其是需要在实时监控观测活体脑血管情况下，激光散斑成像可以不接触、直观观测，为研究提供服务。

       应用举例：在一篇关于KM2促进中性粒细胞活化和脑血栓炎症的文章中，就同时运用到激光散斑和MCAO模型。

       这篇文章主要研究改善缺血性卒中患者采用再灌注策略治疗后，预后不理想。中性粒细胞中的核丙酮酸激酶2（PKM2）一种全身炎症的调节因子，在人类和小鼠的缺血性中风发病后表达上调。所以利用先前存在共病的小鼠模型确定PKM2在中风发病机制中的作用。在机制上，PKM2通过促进STAT3磷酸化调节外周中性粒细胞缺血后炎症。为了明确基因翻译的意义，使用小分子药物抑制PKM2核转位，发现显著降低了中性粒细胞过度激活，改善了中风后的短期和长期功能结果。总之，这些发现将PKM2确定为一种新的治疗靶点，以改善再灌注后的脑挽救和恢复。

       模型方式如下：用1–1.5%的异氟醚和医用空气混合麻醉小鼠。切开正中线后，暂时夹闭右侧颈总动脉，并通过颈外动脉将硅单丝或单个同源栓子插入颈内动脉，直至大脑中动脉的起点。60~30分钟后移除细丝并打开颈总动脉（对于细丝模型）或通过输注rtPA（10 mg/kg，10%体积的团注，缓慢输注30分钟）实现（对于栓塞模型）。对每只小鼠进行激光散斑成像，以确认成功诱导缺血和再灌注。

       在不同时间点进行了激光斑点成像。PKM2缺失小鼠在再灌注后30、60和120分钟局部CBF得到改善（图A）。与这些结果一致，观察到脑内纤维蛋白（原）、血小板（CD41阳性）沉积显著减少，小鼠的血栓指数降低图B和C。